Опыт 6.2. Изучение распределения каталазы в намоченных семенах гороха и влияния температуры на активность этого фермента

Каталаза - это фермент, катализирующий разложение пероксида водорода с образованием молекулярного кислорода, выделяющегося в виде пузырьков газа:

Пероксид водорода образуется в некоторых растительных и животных клетках в качестве побочного продукта метаболизма. Соединение это токсично для клеток, и каталаза обеспечивает эффективное его удаление. Каталаза - один из наиболее быстро работающих ферментов: при 0°С одна молекула каталазы разлагает в 1 с до 40000 молекул пероксида водорода. Локализуется каталаза в микротельцах (гл. 7) и пероксисомах (гл. 7 и 9).

Материалы и оборудование

Горсть намоченного гороха

Раствор пероксида водорода

Пробирки со штативом

Водяные бани с температурой 40, 60, 70, 80 и 100°С

Часы

Термометр

Скальпели, ножницы и пинцеты

Держатель для пробирок

Стеклянная палочка

Белая кафельная плитка

Методика

1. Убедитесь в наличии каталазы. Для этого разомните одну горошину и нанесите на нее несколько капель пероксида водорода.

2. Снимите с гороха кожуру и проверьте на каталазу по отдельности кожуру и семядоли.

3. Поставьте две пробирки с дистиллированной водой на водяную баню с температурой 40°С.

4. Прокипятите в отдельной пробирке три целые горошины, а затем поместите их в одну из пробирок на водяной бане.

5. В другую пробирку на водяной бане положите три горошины, не подвергавшиеся кипячению.

6. Выдержите пробирки на водяной бане в течение времени, достаточного для того, чтобы они приняли ее температуру (около 10 мин).

7. Проверьте каждую из горошин на каталазную активность.

8. Повторите тот же эксперимент при 50, 60, 70, 80 и 100°С.

9. Зафиксируйте наблюдения и объясните полученные результаты.

6.2. Ознакомьтесь с рис. 6.12. Что вы можете сказать по поводу формы трех кривых, описывающих ход ферментативной реакции при разных температурах?

Рис. 6.12. Ход ферментативной реакции при разных температурах