Йодная реакция на крахмал

Йодная реакция является единственной цветной реакцией на крахмал. Для проведения этой реакции применяется раствор иода в воде, спирте, иодистом калии или в какой-либо просветляющей жидкости. Во всех случаях смоченный крахмал окрашивается в синий, сине-фиолетовый или почти черный цвет^*. Оттенок зависит от состояния крахмального зерна.

^* (Синее окрашивание дает смоченный крахмал, сухой окрашивается иодом в темно-бурый цвет.)

При уменьшении молекулярного веса продуктов гидролиза крахмала (декстринов) окраска их меняется так: сине-фиолетовая, темно-бурая, красная, затем они перестают давать реакцию с иодом.

У некоторых растений крахмальные зерна принимают красный или красно-фиолетовый цвет. Это объясняется присутствием в них декстринов (например, при прорастании семян), либо большого количества амилопектина (например, в зерне восковидной кукурузы).

Окраска, связанная с возникновением химической и адсорбционной связи крахмала с иодом, держится недолго, поэтому препарат следует изучать сразу же после его изготовления.

В тех случаях, когда количество крахмала незначительно, а также при рассмотрении объекта целиком (например, листа), применяется раствор иода в какой-либо просветляющей жидкости (хлоралгидрате, молочной кислоте). При этом просветляющая жидкость разрушает клеточное содержимое, просветляя объект, и производит оклейстеризование крахмального зерна, что улучшает условия присоединения иода к крахмалу. Можно пользоваться также жавелевой водой, после действия которой крахмал обнаруживается раствором Люголя^*.

^* (Для просветления объект помещается в каплю жавелевой воды на время от 10 мин до нескольких часов.)

Реактивы

1) Раствор Люголя (раствор иода в иодиде калия по Грамму).

Приготовление раствора. 2 г калия растворить при нагревании в 5 мл дистиллированной воды, добавить в этот раствор 1 г кристаллического иода. Довести водой объем раствора до 300 мл. Хранить раствор в темной посуде.

2) Раствор иода в хлоралгидрате по Мейеру.

Приготовление раствора. 5 г хлоралгидрата растворить в 2 мл воды и при растворении металлического иода получить насыщенный раствор.

3) Раствор иода в молочной кислоте.

Приготовление раствора. Несколько кристаллов иода растворить в подогретой молочной кислоте.

4) Жавелевая вода.

Приготовление жавелевой воды. 20 г хлорной извести растворить в 100 мл воды, 15 г карбоната калия (поташа) или карбоната натрия растворить в 25 мл воды. Через сутки слить оба раствора и профильтровать.

Проведение реакции с реактивом Люголя

^* (Аналогичным способом проводятся реакции с растворами иода в просветляющих жидкостях.)

1. Поместить срез в каплю реактива^* на предметном стекле и накрыть покровным стеклом.

^* (В случае большого количества крахмала реактив следует разбавить водой (например, при проведении реакции на зерновке).)

2. Наблюдать появление окраски.

Результаты реакции (табл. 4)

Таблица 4. Реакция на крахмал с реактивом Люголя. Лист капусты. 1 - эпидермис; 2 - паренхима листа; 3 - колленхима пучка; 4 - ксилема; 5 - камбий; 6 - флоэма (увеличение 7 X 8 и 7 X 40)

В Клетках паренхимы листа капусты обнаруживаются крахмальные зерна различных размеров. Особенно много крахмала в слое паренхимы, окружающем пучок. В клетках флоэмы, ксилемы и паренхимы пучка крахмал отсутствует.

Эндосперм зерновки кукурузы окрашивается в темно-лиловый, почти черный цвет. Клетки его забиты крупными крахмальными зернами. В алейроновом слое крахмал отсутствует. При большом увеличении микроскопа крахмал обнаруживается в щитке зародыша в виде мелких зерен. В корешке и почечке, а также в эпителии щитка крахмала нет.