Монтирование парафинированного материала для резки на микротоме

Монтирование парафинированного материала для резки на микротоме производится следующим образом: отдельные корешки (пыльники, семяпочки и т. д.) выплавляют из парафиновой плиточки разогретой препаровальной иглой, нагретым глазным зондом или тому подобным инструментом; вместо этого можно растопить (в тигле или чашке на пламени горелки или в термостате) всю плиточку и извлечь оттуда нужный материал. После этого надо на одной из торцовых сторон кубика, которая покрыта слоем расплавленного и затем застывшего парафина, сделать небольшое возвышение - бугорок из парафина. Парафин наносят каплями, падающими с умеренно нагреваемой над пламенем горелки или спиртовки парафиновой палочки. При этом надо следить, чтобы наносимый парафин хорошо слился с парафином, покрывающим кубик. В противном случае он может легко отколоться от него и отпасть при резке. После того как возвышение слегка затвердеет, в него надо вмонтировать приготовленный выплавленный материал, например корешки. Для этого их слегка погружают в парафиновый бугорок и постепенно покрывают каплями теплого парафина ("закапывают"). Нужно следить, чтобы парафин не стекал, а удерживался вокруг заплавляемого объекта и чтобы объект сохранял заданное расположение. При остывании необходимо следить, чтобы материал вполне слился с окружающим его парафином и не был отделен от него трещинами, что обычно бывает при заплавлении в сильно остывший парафин. Это мешает нормальной резке, так как срезы крошатся и распадаются на отдельные части, которые трудно собрать.

После того как весь объект или объекты будут скрыты в парафине и парафин застынет, полученному парафиновому "блоку", имеющему неправильную цилиндрическую или усеченноконическую форму, следует придать форму правильной четырехгранной призмы с гранями, параллельными граням кубика и режущему краю микротомного ножа (рис. 24). Это необходима для того, чтобы при резке на микротоме все последовательно появляющиеся срезы получались одинакового размера и правильной прямоугольной формы и, слипаясь между собой краями образовывали прямую "ленту" (серию срезов). Если срезы будут неправильной формы, при соединении их будет образовываться искривленная неровная лента.

Рис. 24. Кубики с парафиновыми блоками

Для придания блоку формы призмы парафин срезают с каждой стороны блока тонкими слоями безопасной бритвой, держа бритву строго вертикально. Верх блока также выравнивают, срезая лишний, неровно застывший парафин. Однако следует оставить небольшой слой парафина над объектом, чтобы в начале резки первые срезы были пустыми и не было опасности во время налаживания этой работы потерять нужные срезы.

В некоторых случаях вместо "закапывания" можно вырезать блок с объектом непосредственно из плитки и плотно приплавить его к подставке, ориентируя нужным образом. Для этого при выливании залитого в парафин материала в коробочку его нужно правильно и равномерно расположить. Этот способ, кажущийся более простым, однако, имеет свои недостатки. Блок оказывается односторонним, так как материал при выливании опускается на дно, благодаря чему со стороны блока, соответствующей низу плитки, объект располагается слишком близко к краю. Кроме того, его труднее ориентировать. Поэтому предпочтительнее применять способ "закапывания".

К кубику с напаянным на него блоком должна быть прикреплена этикетка с номером материала, данным ему при фиксации.

При установке кубика (или металлической подставки) на столике микротома надо следить, чтобы объект был правильно (строго горизонтально или строго вертикально) ориентирован относительно плоскости микротомного ножа и его режущего края. Эта ориентировка уточняется путем наклона столика в любом направлении с помощью системы шарниров и винтов. После закрепления кубика надо установить микротом на нужную толщину резки путем закрепления микрометрического винта в нужном положении.