Реакция на аскорбиновую кислоту

Эта реакция основана на способности аскорбиновой кислоты восстанавливать нитрат серебра. Восстановленное серебро выпадает в виде кристаллического осадка.

Многие вещества (глюкоза, полифенолы и др.) способны восстанавливать нитрат серебра, но только в щелочной среде. Поэтому для придания реакции специфичности на аскорбиновую кислоту надо создавать кислую среду (pH=4), хотя аскорбиновая кислота восстанавливает нитрат серебра и в кислой, и в нейтральной, и в щелочной среде. Глютатион и цистеин также могут восстанавливать нитрат серебра в кислой среде, но при нагревании. Аскорбиновая кислота дает эту реакцию без подогревания. Надо иметь в виду, что нитрат серебра восстанавливается под воздействием света, и поэтому реакцию надо проводить в темноте. Реакцию дает только восстановленная форма аскорбиновой кислоты, окисленная форма не выявляется.

Для оценки общего количества аскорбиновой кислоты необходимо перевести окисленную форму в восстановленную. Для этого материал надо подвергнуть действию паров уксусной кислоты и сернистого газа. В клетках растений окисленной формы аскорбиновой кислоты немного, поэтому только что упомянутых операций можно не производить.

В результате реакции выпадает черный осадок металлического серебра в виде мелких кристаллов.

Реактивы

5%-ный раствор нитрата серебра в 5%-ной уксусной кислоте^*.

^* (Употребляется также 10%-ный раствор нитрата серебра в 1%-ном растворе уксусной кислоты.)

Проведение реакции

1. Поместить препараты в 5%-ный раствор нитрата серебра на 15-20 мин в темноту.

2. Наблюдать выпадение черного кристаллического осадка.

Результаты реакции (табл. 33)

Таблица 33. Реакция на аскорбиновую кислоту. Проводящий пучок листа капусты. 1 - колленхима пучка; 2 - паренхима пучка; 3 - ксилема; 4 - паренхима ксилемы; 5 - камбий; 6 - флоэма (увеличение 7 X 40)

Реакция протекает интенсивно во всех тканях листа капусты. В периферических слоях листа реакция сильнее, чем во всей его толще. Особенно интенсивна реакция во флоэме, камбии, а также в колленхиме и паренхиме, окружающих пучок. Обилие в этих тканях аскорбиновой кислоты указывает на то, что в них активно идут окислительно-восстановительные процессы, связанные с обменом и синтезом веществ.

Аскорбиновая кислота не обнаруживается в эндосперме и алейроновом слое зерновки кукурузы. В зародыше гранулы серебра заметны в корешке и колеоризе, а также в почечке, колеоптиле, в проводящей системе и на вершине щитка. Таким образом, и здесь аскорбиновая кислота обнаруживается в органах, где интенсивно идет синтез веществ.