Гистохимические реакции на некоторые физиологически активные вещества

Реакция Сальковского на гетероауксин

При взаимодействии гетероауксина с раствором железоаммиачных квасцов в крепкой серной кислоте (реактив Сальковского) возникает фиолетово-красное окрашивание. Химизм этой реакции не раскрыт. Используется только свежий, нефиксированный материал.

К недостаткам реакции надо отнести ее неполную специфичность, диффузность окраски и невысокую чувствительность.

Реакция не вполне специфична, так как она осуществляется не только с β-индолилуксусной кислотой (гетероауксином), но и с другими производными индола (альдегиды β-индолилуксусной и подобных ей кислот). Все эти производные индола физиологически активны.

Реактивы

Реактив Сальковского.

Приготовление реактива. 0,1 г сухих железоаммиачных квасцов растворить в 100 мл 50%-ной серной кислоты. Полученный раствор можно разводить водой, если исследуются нежные объекты.

Проведение реакции

1. Капнуть на срез реактивом Сальковского, накрыть покровным стеклом.

2. Осторожно подогреть срез.

3. Наблюдать появление коричнево-фиолетово-красной окраски.

Можно сначала подогреть срез в капле реактива, а затем остудить его и накрыть покровным стеклом. Реакция пойдет ровнее, но есть опасность, что часть гетероауксина улетучится. На холоде реакция идет медленнее, поэтому подогревание необходимо, но это надо делать очень осторожно (при перегреве появляется черно-бурая окраска). Кроме того, при сильном нагревании объект сгорает в серной кислоте.

Результаты реакции (табл. 32)

Таблица 32. Реакция на гетероауксин. Зерновка кукурузы. А - общий вид зерновки кукурузы в разрезе; Б - детали строения зерновки кукурузы; 1 - зародышевый корешок; 2 - щиток; 3 - всасывающий эпителий; 4 - алейроновый слой и прилегающие клетки эндосперма; 5 - алейроновый слой в нижней части зерновки; 6 - эндосперм около средней части щитка; 7 - эндосперм из центральной части зерновки; 8 - колеоптиле; 9 - точка роста почечки; 10 - проводящие пучки; 11 - колеориза (увеличение 7 X 8 и 7 X 40)

Очень слабо реакция проявляется в паренхиме листа капусты, несколько заметнее она в ее периферических слоях. Пучки и сопровождающая их паренхима и колленхима дают несколько более яркую окраску. Это связано, по-видимому, с более активными обменными процессами, протекающими во флоэме, камбии и окружающих их живых тканях.

Слабозаметная реакция наблюдается в эндосперме зерновки кукурузы; в зародыше реакция более четкая, особенно в корешке, почечке и проводящих путях, а также в эпителии щитка и близ него в эндосперме. Здесь также наблюдается активность гетероауксина в местах более интенсивного обмена веществ.