Реакция на неспецифическую кислую фосфатазу

Принцип реакции, так же как и для щелочной фосфатазы, основан на освобождении ионов фосфорной кислоты и образовании нерастворимого фосфата свинца. Выпавший в осадок бесцветный фосфат свинца после обработки сульфидом аммония превращается в коричневый сульфид свинца.

Реактивы

1) Среда, содержащая фосфат.

Приготовление среды. Слить 2 мл 2%-ного раствора (5-глицерофосфата натрия, 1 0,1 М ацетатного буфера, 1 мл 2%-ного раствора уксуснокислого свинца, 1 мл 0,5%-ного раствора хлорида магния.

2) Разведенный раствор сульфида аммония.

3) Глицерин.

Проведение реакции

1. Поместить срезы из свежего материала в среду, содержащую фосфат, при 37° С на несколько часов.

2. Сполоснуть их в дистиллированной воде.

3. Перенести срезы в раствор сульфида аммония на 1-2 мин.

4. Промыть их водой и заключить в глицерин.

5. Наблюдать выпадение коричневого осадка.

Результаты реакции

Выпадение коричневого осадка сульфида свинца указывает на наличие фермента.